MicroRNA-195-5p调节Bmpr1α表达对骨髓间充质干细胞成脂分化的影响

MicroRNA-195-5p affects adipocyte differentiation in bone mesenchymal stem cells by regulating Bmpr1α gene expression

二维码有效期 120s

摘要目的探讨miR-195-5p在补肾方含药血清干预大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell, BMSC)中的表达及其对成脂分化的影响.方法体外贴壁法原代培养的大鼠BMSC细胞经流式细胞术、CD44和CD34免疫荧光染色鉴定后,与椎间盘软骨细胞和成骨细胞一起采用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中rno-miR-195-5p的表达情况;采用荧光素酶报告基因实验验证骨形态发生蛋白受体-1α(Bmpr1α)是否为rno-miR-195-5p的靶基因,采用Western印迹法和油红O染色检测rno-miR-195-5p对Bmpr1α表达和BMSC成脂分化的影响.结果流式细胞术与免疫荧光分析显示所培养细胞具备BMSC特征.rno-miR-195-5p在补肾方含药血清干预的原代BMSC中表达明显升高( P <0.01),且在分化完成的软骨细胞和成骨细胞中高表达.双荧光素酶报告实验与Western印迹法证实Bmpr1α是rno-miR-195-5p的靶基因.转染rno-miR-195-5p mimics上调BMSC中rno-miR-195-5p可抑制Bmpr1α的表达( P <0.05),降低成脂分化能力;而转染rno-miR-195-5p inhibitor可显著增加BMSC中Bmpr1α的表达( P <0.01),增强成脂分化能力.结论补肾方含药血清干预BMSC上调rno-miR-195-5p,通过降低其靶基因Bmpr1α的表达而降低BMSC的成脂分化,改善骨质疏松症状.

作者潘欣 ^[1] 曾思良 ^[2] 梁兴伦 ^[3] 嵇承栋 ^[3] 刘晓东 ^[3] 廖万清 ^[4] 学术成果认领

作者单位同济大学附属杨浦医院中心实验室,上海 200090;上海俊维寓医医院有限公司检验科,上海 200433 ^[1] 上海师范大学天华学院康复治疗学系,上海,201815 ^[2] 同济大学附属杨浦医院中心实验室,上海,200090 ^[3] 第二军医大学附属长征医院皮肤科,上海,200003 ^[4]

关键词骨形态发生蛋白受体-1α rno-miR-195-5p 骨髓间充质干细胞骨质疏松 bone morphogenetic protein receptor type 1A rno-miR-195-5p bone mesenchymal stem cell osteoporosis

主题词间质干细胞(Mesenchymal Stem Cells)骨髓(Bone Marrow)成脂分化(Adipogenesis)骨形态发生蛋白受体(Bone Morphogenetic Protein Receptors)骨质疏松(Osteoporosis)

分类号 R34

栏目名称 基础研究

DOI 10.16118/j.1008-0392.2017.03.001

发布时间 2017-07-24

基金项目

国家“九七三”重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 上海市卫生和计划生育委员会科研项目 同济大学附属杨浦医院学科带头人攀登计划