摘要目的:探讨定志小丸化裁方(原方去石菖蒲,加丹参、银杏叶)通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路对自然衰老小鼠学习记忆能力的保护作用及其机制.方法:采用自然衰老小鼠模型,将老年小鼠随机分为老年组、阳性药(多奈哌齐)组、定志小丸化裁方低、中、高剂量组,另设青年对照组.通过Morris水迷宫、新物体识别和跳台试验评估小鼠学习记忆能力;采用苏木精-伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色观察小鼠脑组织海马神经元形态;免疫组织化学法(IHC)检测海马组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)测定海马组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果:(1)与青年对照组比较:老年组小鼠脑组织海马神经细胞排列松散、数量较少、形态不规则,尼氏体数量较少;Morris水迷宫试验定位航行试验第1～5天总游程明显增加,第2～5天潜伏期明显延长;空间探索试验总游程明显增加,目标象限穿台次数明显减少;新位置、新物体识别试验中,老年组小鼠通过经典方法识别计算、AI技术识别计算的物体位置识别指数、新物体识别指数均明显降低;跳台试验中,老年组小鼠跳台潜伏期明显缩短,跳台错误次数明显增加;老年组小鼠脑组织海马PI3K、Akt、mTOR蛋白表达明显降低,海马中IL-1β、IL-6及血清中TNF-a含量明显上升,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).(2)与老年组比较:阳性药组、定志小丸化裁方低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠海马神经元数量增加且排列有序;水迷宫试验定位航行试验,阳性药组小鼠第1～5天总游程明显缩短,中剂量组第5天明显缩短,高剂量组第2～5天明显缩短;潜伏期,阳性药组小鼠第2～5天明显缩短,中剂量组第5天明显缩短,高剂量组第3～5天明显缩短;空间探索试验,阳性药组、高剂量组小鼠总游程明显缩短、目标象限穿台次数明显增加,中剂量组目标象限穿台次数明显增加;新位置识别试验中,阳性药组、高剂量组小鼠通过经典方法识别计算、AI技术识别计算的物体位置识别指数明显提高,中剂量组通过AI技术识别计算的物体位置识别指数明显提高;新物体识别试验中,阳性药组、高剂量组小鼠通过经典方法识别计算、AI技术识别计算的新物体识别指数均明显增加,中剂量组通过AI技术识别计算的新物体识别指数明显提高;跳台试验中,阳性药组、定志小丸化裁方高、中剂量组小鼠跳台潜伏期明显增加,高剂量组跳台错误次数明显减少;阳性药组、高剂量组小鼠脑组织海马中PI3K、Akt、mTOR蛋白表达水平明显升高,中剂量组Akt、mTOR蛋白表达水平明显升高,阳性药组、高剂量组、中剂量组小鼠脑组织海马IL-1β、IL-6以及血清中TNF-α水平明显下降,低剂量组血清中TNF-α含量明显下降,以上差异均有统计学意义(P<0.01).结论:定志小丸化裁方可能通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路、抑制神经炎症和调节自噬,改善自然衰老小鼠的学习记忆能力,为中医药防治衰老相关认知障碍提供了实验依据.