高级蛋白氧化产物对人脐静脉内皮细胞ECV-304的作用
Effects of advanced oxidation protein products modified protein on human umbilical vein endothelial cells
摘要目的 观察体外制备的高级蛋白氧化产物修饰蛋白(AOPP-HSA)对人脐静脉内皮细胞(ECV-304细胞株)的作用.方法 在高压液相色谱仪(HPLC)中将人血清白蛋白(HSA)用次氯酸处理制备AOPP-HSA,观测AOPP-HSA对ECV-304细胞增殖和凋亡,细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和E-选择素(E-selectin)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达,以及P50、P65和I-кB的mRNA表达含量的影响.结果 (1)AOPP-HSA与ECV-304细胞共同孵育后,可使其增殖指数下降,约为对照组的70%~80%.凋亡试验结果:AOPP-HSA组细胞早期凋亡较对照组升高17%.(2)ECV-304细胞有ICAM-1和MCP-1的基础表达,与AOPP-HSA共同孵育24 h后,两者的表达均有上调,以VitE预先孵育后,其表达量均较相应浓度AOPP-HSA组有明显下降;ECV-304细胞无E-selectin的基础表达,给予AOPP-HSA后也无改变.(3)ECV-304细胞与AOPP-HSA共同孵育后,其P50、P65的mRNA的相对表达含量均显著上调,在VitE干预组,P50、P65的相对表达含量较相应AOPP-HSA组下降.I-кB mRNA的相对表达含量在AOPP-HSA 100~400 μmol/L各组均明显下降,而在AOPP-HSA 600 μmol/L组中,其I-кB的相对表达含量出现显著的升高,给予VitE干预后,I-кB的相对含量也出现明显升高.结论 AOPP-HSA对ECV-304细胞具有多种生物学效应,可抑制增殖、促进凋亡、上调黏附分子和趋化因子的表达.这些作用可能是通过影响NF-кB而产生的.氧化应激参与了这些作用的发生.
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