换一批
换一批一种骨髓单个核细胞新型示踪方法——细胞膜染料DiD标记法
A new tracing method of bone marrow mononuclear cells by cell membrane dye DiD
摘要目的 检测细胞膜染料DiD对骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells,BM-MNC)的染色效率和造血功能的影响,并用DiD示踪BM-MNC活体直观观察DiD标记的BM-MNC在小鼠颅骨骨髓内的顺利归巢.方法 体外流式细胞术分析方法和激光共聚焦扫描显微镜成像方法检测BM-MNC的DiD染色效率;CCK-8细胞活性-增殖实验和造血集落形成实验,检测DiD染料对BM-MNC的造血功能的影响;单/双光子共聚焦显微镜下活体直观观察DiD标记的BM-MNC在小鼠颅骨骨髓内的归巢.结果 BM-MNC的DiD染色效率高达90％以上,且DiD对BM-MNC的细胞活性-增殖和造血能力均无明显的毒性影响(P＞0.05);单/双光子共聚焦显微镜下,在活体小鼠颅骨骨髓内可直观观察到DiD标记的BM-MNC的顺利归巢.结论 细胞膜染料DiD对BM-MNC的染色效率高、均一,无明显细胞毒性,荧光不易被淬灭,且受机体自身组织的背景干扰少,用于活体示踪时DiD标记的BM-MNC可顺利归巢到骨髓.
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关键词
细胞膜染料骨髓单个核细胞造血干细胞移植cell membrane dyebone marrow mononuclear cellshemapoietic stem cell transplantation
分类号
R457.7
栏目名称
方法技术
DOI
10.3969/j.issn.1672-8467.2016.06.010
发布时间
2017-01-08
基金项目
国家自然科学基金
上海市基础研究重点项目
上海市优秀学术带头人计划(16XD1400600)This work was supported by the National Natural Science Foundation of China
the Key Program of Basic Research of Shanghai
the Excellent Leading Scholar Program of Shanghai
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