高氧暴露BPD小鼠模型中巨噬细胞焦亡的检测及意义

Detection and significance of macrophage pyroptosis in a hyperoxia-exposed BPD mouse model

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摘要目的探讨巨噬细胞焦亡是否参与支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的肺病理损伤.方法 40只足月新生小鼠随机分为空气(room air,RA)组和高氧(hyperoxia,HO)组,每组20只.建立慢性高氧诱导的BPD小鼠模型.HE染色评估小鼠的肺泡化情况;CD31免疫组化检测肺血管发育状况;Masson染色分析肺组织的纤维化程度;qRT-PCR检测肺组织中的炎症因子和趋化因子(Il6、Il1b、Mmp12、Ccl2、Ccl5、Il8)基因表达水平;ELISA检测血清和肺组织匀浆中的IL-1β水平;Western blot检测细胞焦亡通路的关键蛋白NLRP3、Caspase-1 p20、N-消皮素 D(gasdermin D,GSDMD)、IL-1β表达;流式分析支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞比例;免疫荧光检测F4/80与NLRP3/Caspase-1/IL-1β的共定位;免疫组化分析AQP5的表达水平.结果与RA组相比,HO组小鼠的肺泡化阻滞和肺血管生成障碍,肺纤维化显著增加;肺组织中促炎细胞因子的表达显著上调,细胞焦亡相关蛋白表达水平显著增加,血清和肺组织匀浆中IL-1β水平显著升高;支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞比例显著升高,肺组织中F4/80与NLRP3、Caspase-1、IL-1β均存在显著的免疫荧光共定位现象,AQP5阳性的肺泡Ⅰ型上皮细胞严重受损.结论高氧诱导的BPD小鼠模型中,NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路过度活化,可能导致BPD的肺部病理损伤.

作者 涂子坤 ^[1] 高雅静 ^[2] 韩晓 ^[1] 郭海艳 ^[1] 周玉峰 ^[2] 学术成果认领

作者单位 国家儿童医学中心/复旦大学附属儿科医院儿科研究院上海 201102;国家卫生健康委员会新生儿疾病重点实验室(复旦大学) 上海 201102 ^[1] 国家儿童医学中心/复旦大学附属儿科医院儿科研究院上海 201102;国家卫生健康委员会新生儿疾病重点实验室(复旦大学) 上海 201102;复旦大学生物医学研究院上海 200032 ^[2]

关键词支气管肺发育不良(BPD)消皮素D(GSDMD)巨噬细胞焦亡小鼠 bronchopulmonary dysplasia(BPD)gasdermin D(GSDMD)macrophage pyroptosis mouse

分类号 R722

栏目名称

论著

DOI 10.3969/j.issn.1672-8467.2023.06.001

发布时间 2023-12-20