换一批利用HuC:RFP标记技术研究Nde1基因敲除斑马鱼的神经发育异常
Investigation of neural developmental abnormalities in Nde1 knockout zebrafish using HuC:RFP labeling technology
摘要目的 通过可视化斑马鱼神经网络发育过程,探索Nde1基因敲除对斑马鱼早期神经发育的影响.方法 利用Nde1-/-与Tg(HuC:RFP+/-)构建Tg(Nde1-/-;HuC:RFP+/-)转基因斑马鱼,HuC启动子驱动神经元表达红色荧光蛋白,直观观察斑马鱼神经网络,追踪斑马鱼神经发育情况,并通过Image J及Prism比较Nde1基因敲除斑马鱼与野生型斑马鱼神经元核团的平均荧光强度及荧光报告蛋白表达量,分析Nde1基因敲除对斑马鱼早期神经发育的影响.结果 从斑马鱼胚胎受精后48 h观察到受精后7天,发现Nde1基因敲除斑马鱼的三叉感觉神经元核团以及脊髓神经元核团的平均荧光强度均低于野生型斑马鱼,RT-qPCR结果也显示红色荧光报告蛋白的mRNA表达量显著低于野生型斑马鱼.结论 Nde1基因缺失可能通过影响神经前体细胞分化和增加凋亡,导致三叉感觉神经元及脊髓神经元发育异常.
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