换一批C2C12细胞和RAW264.7细胞共培养后细胞内钙成像及棕榈酸钠诱导后的改变
Calcium imaging in C2C12 cells and RAW264.7 cells post co-culture and changes induced by sodium palmitate
摘要目的 观察RAW264.7细胞对棕榈酸钠诱导的C2C12细胞胰岛素抵抗模型中钙流的影响.方法 采用C2C12细胞和RAW264.7细胞共培养模拟在体骨骼肌状态.用含2%马血清的高糖培养基培养C2C12细胞,诱导其分化为成熟的肌管细胞后分为5组:对照组(RAW264.7单独培养组)、C2C12和RAW264.7共培养组、C2C12单独培养组,C2C12 和RAW264.7 共培养+棕榈酸钠(sodium palmitate,PA)组和C2C12 单独培养+PA组.用PA(5 mmol/L)诱导培养 24 h建立C2C12细胞胰岛素抵抗模型.将复苏和扩增的RAW264.7细胞等量均匀加入到C2C12细胞中共培养2天,改良台式液培养,钙离子荧光探针Fluo-4 AM装载两种细胞,1,7-二甲基黄嘌呤诱发细胞内的钙流,在激光共聚焦显微镜下拍摄和记录活体细胞的钙成像.结果 对照组未见明显的钙信号变化,共培养的C2C12细胞内有快速且明显的钙信号变化.单独培养的C2C12细胞内钙信号在整个观察期间持续缓慢增加且未出现明显下降,共培养的C2C12细胞内钙信号达峰速度明显快于单独培养的C2C12细胞(P<0.001);加入PA后C2C12细胞内钙信号变化不明显,但PA诱导后共培养组C2C12细胞内仍会出现明显的钙信号变化,且钙信号达峰速度明显快于PA诱导后单独培养的C2C12细胞(P<0.001).结论 RAW264.7细胞共培养可提升正常C2C12细胞和PA诱导后C2C12细胞内钙信号动态响应性.
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关键词
C2C12细胞RAW264.7细胞共培养钙成像棕榈酸钠(PA)1,7-二甲基黄嘌呤C2C12 cellRAW264.7 cellco-culturecalcium imagingsodium palmitate(PA)Paraxanthine
分类号
R337.2（人体生理学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1672-8467.2025.06.013
发布时间
2025-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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