成纤维生长因子23抑制肾小管上皮细胞中血管紧张素转换酶2的表达
Fibroblast growth factor 23 inhibits the expression of angiotensin converting enzyme 2 in renal tubular epithelial cells
摘要目的 观察成纤维生长因子(FGF) 23对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)中血管紧张素转化酶(ACE)2表达的影响.方法 分别采用10、25、100 ng/mL的FGF23(分别为FGF23 10组、FGF23 25组、FGF23 100组)刺激NRK-52E细胞24 h,再以100 ng/mL的FGF23分6、12、24h3个时间点刺激NRK-52E细胞.采用免疫印迹法和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测ACE2 mRNA、蛋白的表达.分别采用50、100、200 ng/mL的FGF2(分别为FGF23 50组、FGF23 100组、FGF23 200组)刺激NRK-52E细胞6和24 h,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测NRK-52E细胞上清液中血管紧张素(Ang)Ⅱ表达量.采用免疫荧光法观察ACE2在细胞中的定位和表达强度.使用FGF受体(FGFR)抑制剂PD173074抑制FGFR1.结果 FGF23100组的ACE2 mRNA和蛋白表达量均显著低于空白对照组(P值均<0.05).随着FGF23刺激时间的延长,ACE2 mRNA、蛋白表达量逐渐减少,在24 h时均显著低于0h时(P值均<0.05).24 h时,FGF23 200组的AngⅡ水平显著高于空白对照组(P<0.05).空白对照组中ACE2荧光强度最强,100 ng/mL FGF23刺激24 h时的ACE2荧光强度最弱.25 nmol/mL的PD173074与100 ng/mL的FGF23共刺激、25 nmol/mL的PD173074刺激NRK-52E细胞24 h时的ACE2蛋白表达量与空白对照组的差异均无统计学意义(P值均>0.05),然而100 ng/mL的FGF23显著低于空白对照组(P<0.05).结论 高浓度的FGF23可以作用于FGFR1抑制肾小管上皮细胞中ACE2的表达.慢性肾衰竭中高FGF23可能通过抑制ACE2发挥潜在的肾脏毒性作用.
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