摘要目的 应用单细胞测序(SCS)技术探索川崎病静脉注射丙种球蛋白(IVIG)治疗无反应患儿免疫细胞及表达变化,筛选相关生物指标.方法 选择2022年12月-2023年8月上海市儿童医院收治的川崎病患儿4例,其中3例为IVIG敏感患儿,1例为IVIG无反应患儿.抽取川崎病患儿急性期及治疗后体温平稳(恢复期)时的外周血2 mL,提取外周血单个核细胞,进行SCS数据分析.比较川崎病患儿的基本临床信息,SCS数据分析结果(IVIG无反应与IVIG敏感患儿急性期和恢复期各细胞类型占比和细胞数量).进行基因本体论(GO)通路富集分析IVIG敏感和IVIG无反应患儿急性期和恢复期B淋巴细胞富集结果,以及B淋巴细胞差异表达基因(DEG)表达情况.结果 4例川崎病患儿中,男3例、女1例,年龄2.1～5.5岁,IVIG使用时发热天数5 d 2例、6 d 1例、4 d 1例,IVIG治疗无反应1例、治疗敏感3例,无冠状动脉(CAL)3例、CAL 1例(IVIG治疗无反应患儿同时并发CAL).IVIG无反应患儿和IVIG敏感患儿急性期单核细胞数量占比均高于恢复期.IVIG无反应患儿急性期B淋巴细胞占比高于恢复期,而IVIG敏感患儿急性期B淋巴细胞占比低于恢复期;IVIG无反应患儿和IVIG敏感患儿急性期自然杀伤(NK)细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞占比均低于恢复期.IVIG无反应患儿恢复期CD8+T淋巴细胞数量(4 603)多于急性期(3 555个),B淋巴细胞数量(329个)少于急性期(2 165个).IVIG无反应患儿急性期和恢复期B淋巴细胞数量分别少于IVIG敏感患儿急性期(6 646)和恢复期(7 986).IVIG无反应患儿恢复期与急性期CD8+T淋巴细胞增幅大于IVIG敏感患儿.基因富集结果显示,IVIG敏感患儿治疗后的B淋巴细胞相关的免疫活化通路及免疫球蛋白受体DEG表达下调,包括免疫应答调节细胞表面受体信号通路、免疫应答激活信号通路、抗原受体介导的信号通路等;而IVIG无反应患儿恢复期的DEG富集与B细胞活化通路及免疫球蛋白受体表达通路无关.IVIG敏感患儿在不同疾病阶段的B恢复期细胞DEG P值差异显著的HSPH1、MS4A1、FCRLA、VPREB3、CD72、LAT2、HSP90AA1、RCSD1、CD79A、FKBP4、HLA-DRB1、MTND3、HSP90AB1、PTPRCAP、CD37(共15个基因)与B淋巴细胞的免疫、增殖、分化或功能有关,其中CD79A、MS4A1、FCRLA与B细胞受体的信号传导有关.结论 B淋巴细胞数量变化及DEG表达与IVIG治疗效果相关,CD8+T淋巴细胞数量增多在川崎病患儿CAL发生机制中起重要作用.