换一批
换一批三元复合因子Net基因的克隆及其真核表达
Clone of ternary complex factor Net cDNA and analysis its expression and function
摘要目的 克隆人Net基因,构建Net基因表达载体并诱导融合蛋白表达.方法 从正常人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中抽提总RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出人全长Net cDNA,构建pEGFP-N1/Net重组体质粒,并将其转染入高表达原癌基因c-fos的人胰腺癌细胞PANC-1中,分析转染细胞的Net表达水平和对细胞增殖力的影响.结果 从人胰腺癌细胞PANC-1中克隆出长约1 224 bp的Net基因目的 片段,成功构建了重组质粒pEGFP-N1/Net,诱导表达目的 蛋白后,Net抑制原癌基因c-fos的表达,进而抑制人胰腺癌细胞的增殖.结论构建重组质粒pEGFP-N1/Net并表达Net融合蛋白,其抑制了细胞的增殖,为进一步研究Net的各种生物学活性及作用机制奠定了基础.
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