换一批
换一批摘要目的 建立一种基于聚合酶链反应(PCR)、位点特异性引物延伸反应(ASE)和核酸试纸条检测技术的单核苷酸多态性(SNP)检测方法.方法 先通过PCR对包含SNP位点的特异基因序列进行扩增;然后通过带有A标记的ASE引物针对SNP位点的不同基因类型进行特异性延伸;延伸后的产物可以与B标记的探针进行杂交结合,形成同时携带A和B标记的杂交产物;而该杂交产物可以通过核酸试纸条进行目视化检测,从而完成对SNP基因型的检测.结果 通过对10倍浓度梯度稀释的人类基因组DNA进行检测,PCR-ASE的检测敏感性为88 ng/反应;通过在同一条核酸试纸条上针对同一SNP位点2种不同基因型的检测,达到了多重检测的目的;PCR-ASE对19名志愿者的5个不同SNP位点的检测结果与基因测序法完全一致.结论 PCR-ASE 是一种简单、准确的SNP基因型检测方法.
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关键词
引物特异性延伸反应单核苷酸多态性核酸试纸条检测技术Allele-specific extensionSingle nucleotide polymorphismNucleic acid detection strip-based detection
主题词
敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)方法(Methods)多态性, 单核苷酸(Polymorphism, Single Nucleotide)基因(Genes)基因型(Genotype)
分类号
R446.1
栏目名称
技术研究与评价?论著
DOI
10.3969/j.issn.1673-8640.2018.06.015
发布时间
2018-08-15
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