CHO-K1细胞的fut8及bax基因敲除及其细胞生长特性研究
Study of permanent knockout fut8 and bax genes based on CHO-K1 cells and the growth characteristics of knockout cells
摘要目的与方法:本研究采用CRISPR-Cas9 基因编辑方法,对CHO-K1 细胞进行岩藻糖基转移酶基因fut8 和细胞凋亡相关基因bax改构.结果:对敲除fut8及bax基因的CHO-K1 细胞通过单细胞培养在基因组水平进行鉴定,筛选获得CHO-K1(fut8-/-)及CHO-K1(bax-/-)双等位基因位点敲除的单细胞株.结论:与野生型CHO-K1 细胞相比,改构后的单细胞株生长曲线表明,CHO-K1(bax-/-)单细胞株仍可维持较高的活细胞密度,CHO-K1(fut8-/-)及CHO-K1(bax-/-)的倍增时间低于野生型细胞,可进一步探索作为工程宿主细胞高效表达外源抗体基因.
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