换一批白蔹乙醇提取物体外抗登革病毒的作用研究
Study on anti-dengue virus effect of ethanol extracts from Ampelopsis Radix in vitro
摘要目的:探讨白蔹乙醇提取物体外抗登革病毒(DENV)的活性及机制.方法:通过噻唑蓝(MTT)法明确白蔹乙醇提取物对BHK-21 细胞的细胞毒性,确定药物的非毒浓度;采用分时给药法筛选白蔹乙醇提取物中具有抗DENV活性的部位并探究药物对DENV的吸附进入过程的影响;细胞病变效应(CPE)法评估药物干预时病毒诱导的细胞病变情况;采用实时荧光定量-聚合酶链式反应(Q-PCR)法、蛋白免疫印迹法以及免疫荧光法检测细胞中病毒E蛋白及NS1 的mRNA及蛋白的表达.结果:成功筛选出 12 种具有抗DENV吸附进入细胞作用的白蔹乙醇提取馏分,且尤以B1～B5 组分抗病毒活性最强;MTT结果显示,B4、B5 组分的半数细胞毒性浓度(CC50)分别为(40.39±5.70)、(20.27±3.43)μg/mL;预给药及低温感染后给药时,对于DENV致细胞活力下降没有明显改善作用,而在低温感染同时给药时,BHK-21 细胞活力得到明显提升,其中B4、B5 的半数有效浓度(EC50)分别为(2.78±0.44)、(1.59±0.16)μg/mL,这表明B4、B5 仅对病毒吸附阶段有抑制作用,此外,给予 10 μg/mL的B4 或 4 μg/mL的B5 时几乎完全抑制DENV诱导的CPE;Q-PCR及免疫荧光结果显示B4、B5 干预后DENV的E蛋白及NS1 蛋白显著降低,表明B4、B5 对病毒RNA及蛋白合成阶段具有显著抑制作用.结论:白蔹乙醇提取物B1～B5 具有较好的抗DENV活性,且该作用可能与阻断DENV吸附至细胞表面有关.
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栏目名称
DOI
10.16306/j.1008-861x.2025.01.008
发布时间
2025-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81730110）
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