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杜仲总提物对大鼠成骨细胞增殖、分化及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

Effects of Du-Zhong cortex extract on osteoblast cell proliferation, differentiation and Col1α Ⅰ expression

摘要目的 观察杜仲总提取物(DZCE)对新生大鼠颅盖骨成骨细胞增殖、分化及分泌Ⅰ型胶原能力的影响.方法 体外分离培养大鼠成骨细胞,分为对照组、地塞米松(DEX) 10-8 mol/L组、杜仲总提取物不同剂量组(10 μg/L、1μg/L、0.1μg/L)共5个组,CCK-8(cell counting Kit-8)检测细胞增殖情况.由Piece BCA蛋白分析试剂盒进行蛋白定量,然后由碱性磷酸酶(ALP)活性测定试剂盒检测成骨细胞的分化情况.用In cell western方法测定成骨细胞中Ⅰ型胶原蛋白(Col1 αⅠ)分泌随时间的变化情况.各组干预24h后,实时荧光定量法检测成骨细胞Col1αⅠ mRNA的表达情况.结果 ①杜仲总提取物各剂量均能刺激成骨细胞的细胞增殖(P<0.01),同时也都能使成骨细胞的分化能力增强(P<0.05).②药物干预后,Ⅰ型胶原蛋白的分泌随时间的变化情况是第1天的高中剂量,第3天的中低剂量能使成骨细胞的Ⅰ型胶原蛋白表达提高(P<0.05),第5天、第7天、第9天,各组Ⅰ型胶原蛋白的分泌量均增加,但杜仲总提取物各剂量组与空白组差异无统计学意义(P>0.05).③PCR检测发现,杜仲总提取物各剂量组的Ⅰ型胶原基因的表达增加,而且这种促进Ⅰ型胶原分泌的能力有量效趋势.结论 杜仲总提取物能显著提高成骨细胞增殖、分化和Col1αⅠ的表达.

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