复方苦参汤对溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中炎症因子及自噬水平的影响
Effect of Compound Sophorae Decoction on inflammatory factors and autophagy levels in colonic tissue of mice with ulcerative colitis
摘要目的 观察复方苦参汤对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中炎症因子及自噬水平的影响,并探讨其作用机制.方法 将20只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、复方苦参汤组、美沙拉嗪组,每组5只.适应性喂养7 d后,除正常组外,其余3组予以3%葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮用7 d制备UC小鼠模型.同时在造模第1天开始,正常组和模型组每日均以质量分数为0.9%的氯化钠溶液灌胃,复方苦参汤组与美沙拉嗪组分别予复方苦参汤(7.28 g/kg)、美沙拉嗪(0.52 g/kg)灌胃,每日1次,连续灌胃7 d.每天记录小鼠体质量、大便性状及便血情况,进行疾病活动指数(DAI)评分.末次灌胃结束后,取各组小鼠结肠组织,测量结肠长度,肉眼观察肠黏膜炎症损伤程度进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分.采用苏木精-伊红染色(HE)法观察结肠组织病理变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)含量;免疫印迹(Western blot)法及实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测自噬相关分子蛋白及mRNA表达.结果 与正常组比较,模型组大鼠DAI评分、CMDI评分、促炎因子IL-1β和IL-18,以及泛素结合蛋白 P62(P62)分子表达升高(P<0.05),结肠长度缩短(P<0.05),而抑炎因子白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)的表达下降(P<0.05),Bcl-2同源结构域(Beclin1)蛋白、微管相关蛋白1A/1B轻链3(LC3)蛋白和其mRNA的表达水平明显降低(P<0.05).与模型组比较,复方苦参汤组与美沙拉嗪组的DAI评分、CMDI评分、促炎因子IL-1β和IL-18,以及P62分子均表达降低(P<0.05),结肠长度显著增加(P<0.05),而抑炎因子IL-4和IL-10,以及Beclin1、LC3的表达水平明显升高(P<0.05).与美沙拉嗪组比较,复方苦参汤组的CMDI评分增加(P<0.05),IL-1β、IL-18及P62的表达均升高(P<0.05),而IL-4、IL-10,Beclin1、LC3的表达降低(P<0.05),同时结肠长度以及DAI评分差异无统计学意义(P>0.05).结论 复方苦参汤可通过促进肠组织自噬的表达,减轻UC结肠炎症反应及病理损伤.
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