换一批
换一批特异性shRNA对小鼠海马神经干细胞中Olig2基因表达的影响
Effects of specific shRNA on the expression of Olig2 gene in mouse hippocampal neural stem cells
摘要目的:构建RNA干扰(RNAi)少突胶质细胞转录因子2(Olig2)基因的小鼠海马神经干细胞(NSCs)体系,用于离体水平研究Olig2对精神分裂症模型海马神经发生的调控作用.方法:海马NSCs原代培养及鉴定;通过荧光显微镜分别观察24、48、72 h后NSCs感染情况,确定慢病毒感染的最佳时间;通过Western Blot筛选有效干扰Olig2的shRNA序列;在NSCs体系中加入浓度为200 μmol/L的MK-801 24 h后,加入有效干扰Olig2的shR-NA,通过Western Blot检测慢病毒感染后的Olig2蛋白表达.结果:慢病毒感染72 h后,海马神经干细胞球荧光表达最强,可达90％;Western Blot结果显示:与对照组比较,Olig2 shRNA3干扰组Olig2的蛋白表达明显降低(P＜0.05);干扰组可明显降低MK-801处理后的NSCs中Olig2蛋白表达(P＜0.05).结论:成功构建RNA干扰Olig2基因的海马NSCs体系,为进一步研究Olig2对精神分裂症后海马神经发生的调控机制奠定了基础.
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栏目名称
原著
DOI
10.16557/j.cnki.1000-7547.2019.03.009
发布时间
2019-07-01
基金项目
国家自然科学基金
宁夏高等学校一流学科建设(宁夏医科大学西部一流建设学科基础医学)资助项目
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