换一批三种去除原代星形胶质细胞中小胶质细胞方法的比较
Comparison of three methods for removing microglial cells from primary astrocytes
摘要目的:本研究拟对3种去除原代星形胶质细胞培养物中小胶质细胞的方法进行比较分析,以探讨不同纯化方法的特点,为研究者选择合适的原代星形胶质细胞培养方法提供依据.方法:将SD乳鼠大脑皮质细胞解离并铺板,根据纯化方法的不同分组为:未纯化组(Control组)、传统振荡纯化组(TO组)、阿糖胞苷(AraC)+TO组和AraC+L-亮氨酸甲酯(LME)组.光学显微镜下观察各组细胞传代后细胞形态,并通过免疫荧光染色检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞比例.AlamarBlue HS检测各组细胞传代后细胞活力.细胞计数统计不同纯化处理后获得的细胞产量.结果:相较于Control组,TO组细胞传代后的细胞纯度(P＜0.0001)和细胞活力(P＜0.0001)显著增加,纯化后获得的细胞总量显著下降(P＜0.001),这些趋势在AraC+TO和AraC+LME组更加明显,AraC+TO和AraC+LME组细胞传代后的细胞纯度(P＜0.0001或P＜0.0001)和细胞活力(P＜0.01或P＜0.001)均显著高于TO组,而获得的细胞总量相较于TO组均有显著下降(P＜0.01或P＜0.01),AraC+TO和AraC+LME组之间无显著差异.结论:TO方法获得富含星形胶质细胞的培养物(纯度＞90％),并且细胞产量高,可以应用于常规细胞研究,而AraC+TO和AraC+LME方法获得高度富集的星形胶质细胞培养物(纯度＞99％),可以应用于神经炎症背景下星形胶质细胞精确作用研究.
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关键词
原代培养星形胶质细胞小胶质细胞阿糖胞苷L-亮氨酸甲酯primary cultureastrocytemicroglial cellcytosine β-D-arabinofuranosideL-leucine methyl ester
栏目名称
DOI
10.16557/j.cnki.1000-7547.2024.05.005
发布时间
2025-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
陕西省科技计划项目（2024SF-YBXM-045）
陕西省中医药管理局项目（2022-SLRH-LJ-013）
西安市科技计划项目（24YXYJ0055）
西安市卫生健康委员会中医药科研项目（SZJ202403）
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