青钱柳多糖对H4IIE肝细胞胰岛素信号传递的影响
Impacts of Cyclocarya Paliurus Polysaccharide on Insulin Signaling Pathway in H4IIE Liver Cells
摘要目的:观察青钱柳多糖对肝细胞胰岛素信号传导通路关键靶点基因、蛋白表达的影响.方法:以H4IIE大鼠肝细胞为模型,培养72 h后,采用Neutral Red法检测青钱柳多糖(50、100、200、400 μg·mL-1)对细胞活性的影响;根据细胞活性检测结果分为正常对照组(Control组)、胰岛素组(Insulin组)、青钱柳多糖低剂量组(LCP组)和高剂量组(HCP组);药物干预2h后RT-PCR检测肝细胞相应基因表达,药物干预30 min后,利用Western blot法检测肝细胞相应蛋白磷酸化水平.结果:与Control组比较,100、200、400 μg· mL-1青钱柳多糖干预后肝细胞活性显著升高(P<0.01);干预2h后,LCP组InsR、IRS-2基因表达显著升高(P<0.05),Insulin组和HCP组InsR、IRS-2基因表达极显著升高(P<0.01);干预30 min后,Insulin组、HCP组InsR β 、IRS-2、Akt蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01).结论:青钱柳多糖具有增加肝细胞活性作用,其上调肝细胞胰岛素信号通路关键靶点InsR、IRS-2基因表达,以及InsRβ、IRS-2、Akt蛋白磷酸化水平可能是其发挥降糖作用的机制.
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