换一批利用干细胞筛选中药神经保护作用活性成分的新方法
A New Method for Screening Active Ingredients of Neuroprotection in Traditional Chinese Medicine by Using Stem Cells
摘要目的:利用干细胞构建可用于药物筛选的细胞模型,初步建立寻找中药活性成分的新方法.方法:首先,克隆神经生长因子(NGF)启动子的序列,连接到含有荧光素酶报告基因/E2红色荧光蛋白的质粒上,并将合成得到的质粒转入HEK-293细胞中,构建基于启动子的初步筛选稳定的细胞模型.使用阳性药进行验证细胞模型的准确性,并用该模型筛选来自中药的小分子化合物.然后使用筛选得到的化合物诱导大鼠的骨髓间充质干细胞,检测相关神经营养因子的转录水平,验证待测小分子化合物可能对神经生长的生物活性.结果:来自中药益智的三种化合物,白杨素、圆柚酮和杨芽黄素均可以激活NGF启动子.白杨素、圆柚酮诱导MSC不同时间后,细胞表面神经标志物:神经生长因子(NGF)、半乳糖神经酰胺(GalC)、巢蛋白(Nestin)、神经元特异烯醇化酶(NSE)、波形蛋白(Vimentin)对应RNA的转录水平均有不同程度的提高.而杨芽黄素没有明确促进神经细胞分化的活性.结论:白杨素、圆柚酮可以促进干细胞向神经细胞分化,是中药益智发挥神经保护作用物质基础的组成部分.
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医学主题词
中草药(Drugs, Chinese Herbal)干细胞(Stem Cells)神经生长因子(Nerve Growth Factor)神经保护(Neuroprotection)药物评价, 临床前(Drug Evaluation, Preclinical)
分类号
R285.1（中药学）
栏目名称
DOI
10.11842/wst.2019.04.001
发布时间
2019-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
科技部重点研发计划项目（2018YFC1706200）
四川省中医药管理局建设专项（2018C031）
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