摘要目的 网络药理学分析并实验验证温胆汤治疗失眠的潜在靶点,为失眠靶向治疗提供思路和方向.方法 中药系统药理学数据库与分析平台筛选温胆汤活性成分及靶点.蛋白质-蛋白质交互作用网络分析靶点蛋白质间的作用关系.生物学信息注释数据库、基因本体和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Gnomes,KEGG)分析温胆汤生物学过程、细胞组分、分子功能和富集通路.人类基因数据库查找失眠靶点,得到温胆汤和失眠共有靶点,构建共有靶点蛋白质-蛋白质交互作用网络.Cytoscape(可视化软件)分析共有靶点的核心基因,对共有靶点进行生物学功能和通路富集分析,综合核心基因参与的生物学功能和信号转导,确定温胆汤治疗失眠的核心靶点.同时,通过体内实验验证核心靶点mRNA表达水平.结果 温胆汤有97种活性成分,266个靶点,失眠相关靶点有2587个,共有靶点119个.核心靶点包括:AKT丝氨酸/苏氨酸激酶 1(AKT serine/threonine kinase 1,AKT1)、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)、白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)、肿瘤蛋白P53(Tumor protein P53,TP53)、血管内皮生长因子A(Vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、半胱天冬酶3(Caspase 3,CASP3)、基质金属蛋白酶9(Matrix metallopeptidase 9,MMP9)、丝裂原活化蛋白激酶3(Mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3).PI3K-AKT信号通路、凋亡、p53信号通路在温胆汤治疗失眠的过程中发挥重要作用.动物实验发现,与对照组相比,模型组小鼠脑组织中AKT1和MAPK3表达水平显著降低(P<0.05),TP53、VEGFA、Caspase-3、TNF表达水平显著升高(P<0.05).与模型组相比,高剂量组小鼠脑组织中AKT1和MAPK3表达水平升高,P53、VEGFA、Caspase-3、TNF表达水平降低.结论 温胆汤治疗失眠症的潜在作用靶点与AKT1、MAPK3、TP53、VEGFA、Caspase-3、TNF调控的细胞增殖和凋亡相关.