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基于代谢组学研究葫芦素B诱导人肝内胆管癌HuCCT1细胞凋亡的作用机制

Study on the Mechanism of Cucurbitacin B Inducing Apoptosis in HuCCT1 cells of Intrahepatic Cholangiocarcinoma Based on Metabonomics

摘要目的 探究葫芦素B(CuB)诱导人肝内胆管癌HuCCT1细胞凋亡的作用及机制.方法 将HuCCT1细胞分为对照组,CuB给药低(50 nmol·L-1)、中(100 nmol·L-1)、高(200 nmol·L-1)剂量组,给予药物干预24 h,采用Annexin V/PI双染法和Hoechst染色法检测细胞凋亡情况.采用超高效液相色谱/四极杆飞行时间质谱(UHPLC-Q/TOF-MS)检测其主要差异代谢物,并分析其相关代谢通路.结果 Annexin V/PI双染结果发现,与对照组相比,经CuB给予处理后HuCCT1细胞的凋亡比例从7.86%±0.73%增加到16.53%±0.27%,P<0.0001;Hoechst染色结果发现,与对照组相比,经200 nmol·L-1 CuB给予处理24 h后细胞结构被破坏,细胞破碎,边缘轮廓不规则,出现大量核固缩现象;代谢组学分析筛选出了20个显著的差异代谢物,主要涉及的代谢通路包括TCA循环、能量代谢、氨基酸代谢和脂质代谢等.结论 CuB具有较好的抗肿瘤作用,可能是通过干扰HuCCT1细胞的多条代谢通路,引起细胞快速增殖的物质缺乏,最终导致细胞凋亡,而发挥药理作用.

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