Cer(d18:1/16:0)促进HK-2细胞线粒体障碍和纤维化表型转换
Cer(d18:1/16:0)Promotes Mitochondrial Dysfunction and Fibrotic Phenotype Transformation in HK-2 Cells
摘要目的 探究糖尿病肾病(Diabetic kidney disease,DKD)发展进程中的核心标志物Cer(d18:1/16:0)对人肾小管上皮细胞(Human renal proximal tubule,HK-2)线粒体功能障碍和纤维化表型转换的影响.方法 借助qRT-PCR技术,检测高糖刺激下HK-2细胞神经酰胺合成的相关酶在转录水平的表达;使用CCK8法检测不同浓度Cer(d18:1/16:0)对HK-2细胞活力的影响;运用线粒体荧光探针评估不同浓度Cer(d18:1/16:0)刺激后HK-2细胞内线粒体数目变化;Western blot检测给予Cer(d18:1/16:0)前后线粒体相关蛋白及纤维化指标的表达情况.结果 高糖环境下HK-2细胞神经酰胺合成酶2(Ceramide synthase 2,CERS2)表达增加;外源性Cer(d18:1/16:0)可显著抑制HK-2细胞活力;外源性Cer(d18:1/16:0)可降低HK-2细胞中线粒体总荧光强度和平均荧光强度;外源性Cer(d18:1/16:0)显著降低CV-ATP5A与CIII-UQCRC2的蛋白表达水平,显著增加Coll 3、α-SMA的蛋白表达水平.结论 Cer(d18:1/16:0)可诱导HK-2细胞发生线粒体功能障碍与纤维化表型转换.
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