摘要目的 探究电针联合推拿对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的保护作用及分子作用机制.方法 本研究选择SD大鼠各50只,按照奇偶数方法将大鼠分为对照组、模型组、电针组、推拿组、电针+推拿组各10只.对照组不做造模处理,其余各组大鼠均在关节腔内注射木瓜蛋白酶构建右侧膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)模型,电针及推拿干预2周;采用改良Le-quesne MG量表评估大鼠行为学表现;分别于干预前后统计大鼠压痛值、热痛阈值;8周后处死大鼠,取腹主动脉血,ELISA法检测各组大鼠血清疼痛介质(K+)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)含量;取大鼠右侧膝关节进行HE染色Mankin评分、TUNEL软骨细胞凋亡分析,甲苯胺蓝染色观察软骨基质多聚糖变化;Western-blot检测各组大鼠膝关节组织内软骨基质因子Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)、C端肽(C-terminal peptide,CTX Ⅱ)、Ⅱ型胶原C前肽(C-precursor peptide,CPⅡ)、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3、YAP、p-YAP浓度表达.结果 KOA模型建立后,大鼠Lequesne MG评分显著提升(P<0.05);与模型组相比,电针组、推拿组大鼠Lequesne MG评分显著降低(P<0.05);二者联合可显著降低Lequesne MG评分(P<0.05);与对照组相比,模型组疼痛阈值(TWL、MWT)显著下调,血清疼痛因子(K+、DA、5-HT)水平显著上调(P<0.05);与模型组相比,电针组、推拿组疼痛阈值(TWL、MWT)显著上调,血清疼痛因子(K+、DA、5-HT)水平显著下调(P<0.05);二者联合体现出最高疼痛阈值(TWL、MWT)及最低血清疼痛因子(K+、DA、5-HT)水平.模型组大鼠关节软骨裂隙明显,软骨基质染色度、着色面积均下降,Markin评分、细胞凋亡能力显著提升(P<0.05);与模型组相比,电针组、推拿组大鼠软骨层排列度、软骨基质染色度、着色面积均显著提升,Markin评分、细胞凋亡率均显著降低(P<0.05);联合可以进一步降低Markin评分及软骨细胞凋亡程度(P<0.05);与对照组相比,模型组Collagen Ⅱ、CPⅡ、Bcl-2、p-YAP蛋白表达降低,CTX Ⅱ、Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达提升(P<0.05);与模型组相比,电针组、推拿组大鼠软骨组织内Collagen Ⅱ、CPⅡ、Bcl-2、p-YAP蛋白表达提升,CTX Ⅱ、Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达降低(P<0.05);二者联合可以进一步提升Collagen Ⅱ、CPⅡ、Bcl-2、p-YAP蛋白表达,抑制CTX Ⅱ、Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达(P<0.05).结论 电针联合推拿干预可以明显改善骨性关节炎大鼠软骨损伤病理状态,减轻膝关节疼痛度,抑制软骨细胞凋亡,起到软骨损伤保护作用,其分子机制可能与激活Hippo-YAP信号通路有关,值得临床进一步研究.