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基于以方测证的哮喘冷哮证大鼠模型的建立与评价

Establishment and Evaluation of Rat Model of Asthma with Cold Asthma Syndrome Based on Diagnosing the Syndrome with Herbal Formulae

摘要目的 探讨哮喘发作期冷哮证大鼠模型的构建和评价方法.方法 32只大鼠随机分为正常组、哮喘组、冷哮组、射干麻黄汤组.除正常组外,其余各组采用腹腔注射+雾化吸入卵清蛋白致敏液建立哮喘模型,其中冷哮组及射干麻黄汤组在此基础上采用"游泳+饮冷+外寒刺激"方法进行证型造模.实验从第14 d开始,射干麻黄汤组予以射干麻黄汤药液灌胃,持续14 d.从宏观及微观层面综合对冷哮大鼠模型进行评价.结果 ①造模后哮喘组及冷哮组哮喘行为学评分均明显升高,体重增长缓慢,出现气道高反应,同时肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluidv,BALF)中嗜酸性粒细胞(Eosinophil,EOS)均明显增多,肺组织水通道蛋白5(Aquaporin,AQP5)表达下降,脾脏Th1/Th2比值下降而Th17/Treg比值升高,全血黏度、全血高切相对指数以及全血低切相对指数出现不同程度的增加,而红细胞聚集指数显著下降.此外,冷哮组还表现出明显的冷哮症状,体重增长较哮喘组更迟缓,且冷哮组全血黏度、全血低切相对指数增加更明显.②射干麻黄汤能减轻冷哮大鼠的哮喘行为学评分及中医证候表现,使体重增长明显增加.同时射干麻黄汤还能减轻冷哮大鼠气道高反应,使BALF中EOS百分比明显下降,减轻肺组织损伤和炎性细胞浸润,增加冷哮大鼠AQP5表达水平,调节Th1/Th2、Th17/Treg免疫失衡,降低冷哮大鼠全血黏度各指标、全血高切相对指数、全血低切相对指数.结论 本实验采用腹腔注射联合雾化吸入卵清蛋白致敏液+游泳+饮冷+外寒刺激制备冷哮大鼠模型,具备冷哮证候特征,符合哮喘病理改变,证实了造模方法的可靠性.

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