换一批
换一批肝癌相关抗原SMP30慢病毒重组子的构建及其对DC成熟作用的观察
Construction of Lentiviral Recombinant Containing Hepatoma Associated Antigen SMP30 and its Effect on DC Maturation
摘要目的 构建小鼠肝癌相关抗原SMP30基因的慢病毒重组子,经体外转染小鼠树突状细胞(dendritic cell,DC)后,检测SMP30慢病毒重组子对DC成熟的影响.方法 运用基因重组技术,将小鼠SMP30基因连接到带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒表达载体Lentivirus中,将上述重组子感染小鼠DC并用荧光显微镜观察感染效果.用流式细胞仪检测感染前后的DC表面分子的差异,判断SMP30慢病毒重组子对DC成熟的影响.结果 将该重组子转染DC后,在荧光倒置显微镜下可观察到被转染的DC有绿色荧光蛋白(GFP)高表达,SMP30慢病毒重组子滴度为4×108TU/mL.流式细胞仪检测表明转染后DC表面CD80的表达高于感染前对照组(P＜0.05),DC表面CD123表达高于CD11c (P＜0.05).结论 成功构建了表达小鼠SMP30的慢病毒重组子,并有效转染小鼠DC使其稳定表达SMP30基因,实验用到的DC主要是DC123型的DC,DC转染SMP30慢病毒重组子后表面CD80表达升高,表明SMP30慢病毒重组子能促进DC的成熟.
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