基于网络药理学和实验验证探究黄精增强免疫功能的作用机制
Network Pharmacology and Experimental Verification Reveal the Mechanism of Immunity Enhancement by Polygonati Rhizoma
摘要目的:探究黄精增强免疫功能的作用机制.方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集黄精活性成分,通过SwissTargetPrediction数据库获得对应靶点基因.使用GeneCards、DrugBank数据库筛选免疫抑制(IS)相关靶点基因,并通过Venny数据库获得与黄精靶点基因的交集基因.使用String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,使用Cytoscape软件构建"黄精-有效成分-靶基因-免疫抑制"网络,利用Metascape数据库对交集基因进行基因本体(GO)富集分析以及京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,使用分子对接对有效成分和靶点进行验证.体外细胞试验采用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞模型,通过MTT法检测不同浓度黄精提取物对细胞的毒性反应;采用Griess法检测黄精提取物对细胞中一氧化氮(NO)的影响.结果:经过筛选,ESR1、SRC、IGF1R、PTGS1、PTGS2等均参与了多个关键生物过程和关键通路.GO富集表明,细胞活化、炎症反应、细胞对应激的反应等为主要生物过程;KEGG富集表明,糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、AMPK、核因子κB信号通路等是关键通路.分子对接结果显示有效成分与核心靶点对接结果良好.体外试验结果显示,与LPS组比较,50,200,800 μg/mL的黄精提取物组RAW264.7细胞中NO生成量均显著降低(均P<0.01).结论:本研究初步预测了黄精增强免疫功能的ESR1、SRC等作用靶点和AMPK、核因子κB等信号通路,并结合Griess法表明黄精可通过调控炎症模型RAW264.7细胞NO的释放来发挥免疫作用.
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