基于调控血管生成相关基因表达的理肺消积丸对肺癌小鼠肿瘤的抑制作用研究
Inhibitory Effect of Lifei Xiaoji Pills on Tumors in Lung Cancer Mice Based on the Regulation of Angiogenesis-related Gene Expression
摘要目的:探讨理肺消积丸通过调控血管生成相关基因表达对肺癌小鼠肿瘤的抑制作用.方法:将30只C57BL/6小鼠采用皮下接种Lewis细胞方式建立肺癌小鼠模型,按照随机数字表法分为模型组、理肺消积组和顺铂组,每组10只.造模次日起依据分组给药,理肺消积组给予理肺消积丸水溶液205 mg/(kg·d)灌胃,等体积生理盐水腹腔注射;顺铂组每隔1 d腹腔注射顺铂0.5 mg/kg,等体积双蒸水灌胃;模型组给予等体积双蒸水灌胃、生理盐水腹腔注射.2周后处死小鼠,留取肿瘤组织,记录小鼠肿瘤质量和体积,苏木精-伊红(HE)染色法观察肿瘤组织病理学变化,免疫组织化学法检测肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)及微血管密度(MVD),聚合酶链反应阵列(PCR array)筛选血管生成相关差异基因,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测肿瘤组织中血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)、趋化因子配体1(CXCL1)、Ⅳ型胶原α3链(COL4A3)基因表达,蛋白质免疫印迹(WB)法检测肿瘤组织ANGPTL3、CXCL1蛋白表达,免疫荧光法检测肿瘤组织COL4A3蛋白表达.结果:与模型组比较,理肺消积丸组、顺铂组肿瘤组织质量、体积显著减少(P<0.01),肿瘤组织病理形态改善,VEGF蛋白表达显著下调,MVD显著减少(P<0.01);与模型组比较,理肺消积组显著上调或下调的差异表达基因共13个,主要包括ANGPTL3、CXCL1、COL4A3等,参与表皮细胞增殖和血管生成相关调控;与模型组比较,理肺消积组小鼠肿瘤组织ANGPTL3、CXCL1和COL4A3基因与蛋白表达均显著下调(P<0.05).结论:理肺消积丸可通过降低与血管生成相关基因(VEGF、ANGPTL3、CXCL1)的表达抑制肺癌小鼠肿瘤生长.
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