清心宁神汤调控磷脂酰肌醇3-激酶信号通路治疗不寐的作用机制
Mechanisms of Qingxin Ningshen Decoction in Treating Insomnia by Regulating Phosphatidylinositol 3-kinase Signaling Pathway
摘要目的:探讨清心宁神汤对心不藏神不寐大鼠的可能作用机制.方法:咖啡因联合4-氯-DL-苯基丙氨酸(PCPA)建立心不藏神不寐模型,将SD大鼠随机分为正常组、模型组、唑吡坦组、清心宁神汤低剂量组、清心宁神汤高剂量组、通路抑制剂组,每组6只.戊巴比妥钠睡眠翻正实验检测药物的协同催眠效应;蛋白质印迹法(WB)检测大鼠脑组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、叉头框蛋白O(FOXO)及对应的磷酸化指标蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-Time qPCR)检测大鼠脑组织PI3K、AKT、FOXO mRNA表达;免疫组织化学(IHC)染色法、免疫荧光抗体技术法(IF)检测大鼠脑组织中PI3K、AKT、FOXO及对应的磷酸化指标水平.结果:与模型组比较,唑吡坦组、清心宁神汤低剂量组、清心宁神汤高剂量组、通路抑制剂组入睡潜伏期显著缩短(P<0.01),睡眠时间延长(P<0.01),脑组织中PI3K、AKT、FOXO及对应的磷酸化指标蛋白表达减少,mRNA表达减少(P<0.05或P<0.01),IHC和IF结果示PI3K、AKT、FOXO及对应的磷酸化指标表达水平减少,荧光面积减少(P<0.05或P<0.01).结论:清心宁神汤可以通过抑制PI3K/AKT/FOXO信号通路调节因子的表达,改善大鼠睡眠状况,且清心宁神汤高剂量组疗效最佳.
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