淫羊藿苷对肱骨骨折大鼠破骨细胞活性和血管形成的影响和作用机制
Effects and Mechanisms of Icariin on Osteoclast Activity and Angiogenesis in Rats with Humeral Fracture
摘要目的:基于血管内皮生长因子(VEGF)/细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路探讨淫羊藿苷(ICA)对肱骨骨折大鼠破骨细胞活性和血管形成的影响.方法:将60只雄性斯泼累格·多雷(SD)大鼠分为正常组、模型组、ICA低(40 mg/kg)剂量组、ICA高(80 mg/kg)剂量组、ICA高剂量+VEGF抑制剂组(80 mg/kgICA+5 mg/kg贝伐单抗),每组12只;采用骨钳截断联合克氏针髓内固定法建立肱骨骨折大鼠模型.给予相应的药物干预21 d后,X线观察骨折愈合情况;双能X线骨密度仪检测肱骨骨密度;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清VEGF、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管生成素-1(ANG-1)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肱骨组织学变化并计数新生血管数量;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞数量;蛋白质印迹法(WB)检测骨组织中VEGF、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)及成骨相关蛋白Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)表达.结果:与模型组比较,ICA低、高剂量组骨折线逐渐消失,骨痂生长增多,肱骨骨密度、血清VEGF、ANG-1、bFGF含量、新生血管数量、骨组织VEGF、p-ERK1/2/ERK1/2、Runx2、ALP蛋白水平均升高,破骨细胞数量减少(P<0.05);VEGF抑制剂贝伐珠单抗可明显削弱ICA对肱骨骨折大鼠骨折愈合的促进作用.结论:ICA可促进肱骨骨折大鼠血管生成,改善破骨细胞活性,加速骨折愈合,其作用机制可能与激活VEGF/ERK1/2信号通路有关.
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