基于艾滋病假病毒干预的自然杀伤细胞探讨益艾康对其的活化机制
Mechanism of Yiaikang on NK Cell Activation Based on HIV Pseudovirus Intervention
摘要目的:利用人类免疫缺陷病毒(HIV)假病毒刺激的自然杀伤(NK)细胞为研究对象,探讨中医药益艾康对其活化性受体2族成员D(NKG2D)、凝集素样受体亚家族C成员1(NKG2A)、胞质毒性颗粒穿孔素(Perforin)、细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF)分泌的影响.方法:磁珠分选HIV阴性健康者外周血NK细胞,选取最适比例的HIV假病毒刺激48 h后,置5%、10%、15%、20%含药血清组及空白对照组,分别加益艾康含药血清及空白鼠血清.流式细胞术检测其活化性受体NKG2D、抑制性受体NKG2A的膜表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞因子IFN-γ、TNF-α分泌;实时荧光定量PCR检测其NKG2D、穿孔素mRNA表达.结果:NKCell MicroBead Cocktail微珠标记分离NK细胞,最终得到90%以上CD3-CD56+/CD16+NK细胞.与空白对照组比较,5%、10%含药血清组对活化性受体NKG2D有明显的激活作用,5%含药血清组能明显促进IFN-γ的分泌(P<0.05),5%、10%含药血清组显著上调活化性受体NKG2D mRNA表达(P<0.05);5%、10%、15%含药血清组明显促进穿孔素mRNA表达.结论:益艾康可以提高HIV感染患者固有免疫应答,作用机制可能与增强其活化性受体NKG2D的活性,促进其胞质毒性颗粒穿孔素、细胞因子IFN-γ的分泌有关.
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