黑骨藤乙醇提取物对膝骨关节炎软骨细胞的影响
Effect of Periploca forrestii Ethanol Extract on Chondrocytes in Knee Osteoarthritis
摘要目的:探讨黑骨藤乙醇提取物通过Yes相关蛋白(YAP)/Hippo信号通路对膝骨关节炎(KOA)软骨细胞的影响.方法:收集KOA患者的软骨组织获取软骨细胞,对软骨细胞鉴定后使用CCK-8法检测不同浓度黑骨藤乙醇提取物通过对KOA软骨细胞的增殖情况.将软骨细胞分为空白组、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-1β组+黑骨藤乙醇提取物低剂量组、IL-1 β组+黑骨藤乙醇提取物中剂量组、IL-1 β组+黑骨藤乙醇提取物高剂量组、IL-1 β组+双醋瑞因组6组,予以不同浓度黑骨藤乙醇提取物和药物干预KOA软骨细胞,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测软骨细胞上清液中IL-6、YAP、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达,q-PCR检测软骨细胞中的Beta-联蛋白(β-catenin)、Sox9、YAP mRNA表达的情况,免疫印迹法检测不同浓度黑骨藤乙醇提取物通过对软骨细胞中YAP、Sox9、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达.结果:与IL-1β组比较,黑骨藤乙醇提取物观察组IL-6、MMP-13、YAP上清液的浓度降低(均P<0.05),软骨细胞中黑骨藤乙醇提取物观察组YAP、β-catenin mRNA降低,Sox9 mRNA升高(均P<0.05),黑骨藤乙醇提取物观察组YAP、Sox9、Caspase-3蛋白表达均降低(P<0.05).结论:黑骨藤乙醇提取物可能通过调控YAP/Hippo信号通路抑制软骨基质的降解、降低炎症介质水平,可能对关节软骨起保护作用.
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