补肾调经系列方调节内质网应激对卵丘卵母细胞成熟与凋亡的影响
Effects of Kidney-tonifying and Menstrual-regulating Formulas on Maturation and Apoptosis of the Cumulus-oocyte Complex in Mice by Regulating Endoplasmic Reticulum Stress
摘要目的:探讨补肾调经系列方调节内质网应激,促进卵丘-卵母细胞复合体(COCs)成熟并抑制其凋亡的作用机制.方法:将小鼠分为正常组、模型组、中药组、抑制剂组.除正常组外,其余组第1~9天腹腔注射醋酸阿拉瑞林(Alarelin),第9天同时注射血清促性腺激素(PMSG),48 h后注射绒毛膜促性腺激素(hCG).中药组第1~9天同时灌胃补肾调经Ⅱ号方,第10~11天同时灌胃补肾调经Ⅲ号方.抑制剂组第1~11天同时注射内质网应激抑制剂(4-PBA).收集COCs观察其内质网形态,观察卵母细胞第一极体(Pb Ⅰ)排出率、皮质颗粒正常分布率,检测内质网应激与凋亡相关mRNA和蛋白的表达.结果:与模型组比较,中药组可提高卵母细胞第一极体排出率、皮质颗粒正常分布率(P<0.05);降低COCs染色细胞凋亡率(P<0.05);降低葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、双链RNA活化蛋白激酶样ER激酶(PERK)、真核翻译起始因子2(eIF2)、激活转录因子4(ATF4)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、胱天蛋白酶12(Caspase-12)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)、Bcl2相关X蛋白(Bax)mRNA和蛋白表达(P<0.05),升高B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)mRNA和蛋白表达(P<0.05).结论:补肾调经系列方可能通过抑制内质网应激PERK-eIF2-ATF4-CHOP信号通路减少COCs凋亡,促进卵母细胞成熟.
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