梅花鹿Fibulin 5编码区cDNA的克隆及功能研究

cDNA coding region cloning and functional analysis of Fibulin 5 in sika deer

摘要为研究梅花鹿扣针蛋白5 (Fibulin 5,FBLN5)在鹿茸再生过程中的作用,本研究通过RT-PCR获得了梅花鹿FBLN 5的cDNA编码区,并对其进行生物信息学分析.同时利用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)下调了梅花鹿角柄骨膜致敏区(Potentiated pedicle periosteum,PPP)细胞中FBLN5基因表达,并研究了基因表达下调后PPP细胞条件培养液对HUVEC细胞增殖的影响.结果显示:(1)梅花鹿FBLN5 cDNA编码区长1 347 bp,编码448个氨基酸;(2)生物信息学软件分析显示,梅花鹿FBLN5蛋白含有一个跨膜区,一段23个氨基酸的信号肽序列,vWA_Matrilin、cEGF和EGF_CA等重要的功能结构域;(3)构建了梅花鹿FBLN5基因的RNAi重组质粒并获得了一条能有效下调目的基因效率达88.72％的靶序列pLVTHM-FBLN2,MTT结果显示PPP细胞FBLN5基因表达量下调后,所获细胞条件培养液可显著促HUVEC细胞增殖,推测FBLN5可能参与了鹿茸再生过程中的血管生成及稳态维持等过程.

作者褚文辉 ^[1] 王权威 ^[2] 王玉俗 ^[3] 王桂武 ^[2] 李春义 ^[4] 学术成果认领

作者单位台州学院,生命科学学院,台州318000 ^[1] 中国农业科学院特产研究所,特种经济动物分子生物学国家重点实验室,吉林省鹿茸工程研究中心,长春130012 ^[2] 吉林农业大学,中药材学院,长春130112 ^[3] 中国农业科学院特产研究所,特种经济动物分子生物学国家重点实验室,吉林省鹿茸工程研究中心,长春130012;长春科技学院,长春130012 ^[4]

关键词梅花鹿鹿茸 FBLN5 生物信息学分析干扰血管生成

主题词研究(Research)计算生物学(Computational Biology)血管(Blood Vessels)细胞(Cells)基因表达(Gene Expression)

分类号 Q958.1

栏目名称 研究论文

DOI 10.16829/j.slxb.150232

发布时间 2019-05-10

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