高山红景天茎尖的包埋-玻璃化超低温保存研究
Cryopreservation of Shoot Tips of Rh.sachalinensis by Encapsulation- vitrification
摘要采用包埋.玻璃化法对高山红景天茎尖进行了超低温保存研究,研究了蔗糖预处理、包埋过程中渗透和不同温度下玻璃化液PVS2处理的时间对超低温保存后茎尖存活率的影响.结果表明,茎尖在0.3,0.5,0.7,1.0mol·L-1的蔗糖溶液中各预培养1 d后,转入1.0 mol·L-1的蔗糖溶液中再培养4 d,使用含2 mol·L-1甘油和1mol·L-1蔗糖的包埋液渗透处理60 min,包埋珠在0℃处理180至210分钟后投入液氮,投入48 h后用40℃水浴快速化冻3 min,用含有1 mol·L-1蔗糖的改良MS培养液洗涤20 min,转入MS+6-BA 1mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1固体培养基中在22℃条件下进行暗培养,2 d后转入光照培养,最高成活率接近100%,再生植株生长和分化正常.
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