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棉铃虫细胞色素P450 CYP6B6多克隆抗体的制备

Preparation of the Polyclonal Antibody against P450 CYP6B6 from Helicoverpa armigera

摘要利用核酸免疫蛋白加强法制备兔抗棉铃虫CYP6B6的多克隆抗体.构建重组质粒pcDNA3-CYP6B6并测序验证序列的正确性后,采用皮下多点注射法将重组质粒注射到新西兰大白兔体内,免疫3次后,第4次使用融合蛋白MBP-CYP6B6加强免疫.用ELISA法检测抗体的效价,并利用免疫组化法对抗体的特异性进行检测,得到的兔抗CYP6B6血清的效价达到1:50000.免疫组化法检测显示此抗血清能与棉铃虫不同组织中存在的CYP6B6蛋白特异性结合,说明利用核酸免疫蛋白加强法制备了高滴度、特异性强的兔抗棉铃虫CYP6B6的多克隆抗体.

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