体外扩增后脐血来源Treg细胞的有效性及安全性研究
An Efficacy and Safety Study of Cord Blood-derived, ex vivo-expanded Tregs
摘要通过检测扩增后调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)的有效性和安全性,研究脐血来源的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的临床运用前景.实验中,新鲜分离的Treg细胞通过CD3/CD28抗体包被微磁珠进行体外扩增,以检测脐血来源Treg细胞的体外增殖能力,同时利用流式细胞术检测新鲜分离的Treg细胞与扩增后细胞的表型.随后,采用混合淋巴实验(mixed lymphocyte reaction,MLR)检测Treg细胞的功能,利用刺激实验检测扩增后Treg细胞的免疫原性,并且利用NOD-Prkdcscid IL2rgnull免疫缺陷小鼠进行体内安全性检测.结果显示,4周后脐血来源的Treg细胞能够扩增到1000倍以上,与新鲜分离的Treg细胞相比,扩增后的细胞CD45RA表达降低,CD45RO和CD39表达升高;同时,MLR结果显示扩增后的Treg细胞具有较强的抑制能力,并且免疫原性低;此外,体内结果显示扩增后的Treg细胞不会引起移植物抗宿主反应.实验结果初步表明,脐血来源体外扩增后的Treg细胞不仅在数量和功能上能够满足临床移植的需要,并且免疫原性低安全性高.
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