人C-反应蛋白磁微粒化学发光酶免疫测定法的建立

Development of Magnetic Particle-based Chemiluminescence Enzyme Immunoassay for Human C-reactive Protein

二维码有效期 120s

摘要人C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是炎症以及各种相关疾病如病毒感染、心血管疾病等诊断、治疗和预后的临床检测指标.为了建立一种快速、准确的CRP定量免疫测定方法,将表达纯化的重组CRP作为抗原免疫小鼠,获得了 5株稳定分泌抗体的单克隆抗体细胞株,采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)初步鉴定筛选的抗人 CRP 单克隆抗体,并分别选择mAb 9D6和mAb 9G4作为捕获抗体与检测抗体,建立用于人CRP检测的化学发光酶免疫测定法(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA),最后通过测定分析临床血清CRP样本,评价CLEIA的性能.结果显示,基于9D6/9G4-AP单克隆抗体对的CLEIA测定范围为0.176 7～500 μg/L(可扩展至100 mg/L);所建立的CLEIA与医院采用的免疫散射比浊法(R2:0.949 6,P＜0.000 1)表现出良好的相关性,且Bland-Altman分析中96.36％(106/110)的点在95％一致性界限范围内显示两种检测方法具有较好的一致性.结果初步表明,建立的分析方法在临床诊断中具有较好的应用前景.

作者罗梦洁 ^[1] 肖铎 ^[2] 曾璇 ^[1] 谭楚帆 ^[3] 徐叶 ^[4] 钟志宏 ^[1] 刘如石 ^[5] 郑姣 ^[6] 学术成果认领

作者单位湖南师范大学医学院,中国湖南长沙 410013 ^[1] 湘潭县人民医院消化内科,中国湖南湘潭 411228 ^[2] 湖南师范大学医学院,中国湖南长沙 410013;湖南旭翔生物科技有限公司,中国湖南长沙 410221 ^[3] 湖南旭翔生物科技有限公司,中国湖南长沙 410221 ^[4] 湖南师范大学医学院,中国湖南长沙 410013;湖南旭翔生物科技有限公司,中国湖南长沙 410221;免疫诊断试剂湖南省工程研究中心,中国湖南长沙 410013 ^[5] 湖南师范大学医学院,中国湖南长沙 410013;免疫诊断试剂湖南省工程研究中心,中国湖南长沙 410013 ^[6]

关键词 C-反应蛋白(CRP)单克隆抗体(mAb)双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)化学发光酶免疫测定法(CLEIA)C-reactive protein(CRP)monoclonal antibody(mAb)double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay(DAS-ELISA)chemiluminescence enzyme immunoassay(CLEIA)

分类号 Q503 R446.6

栏目名称

技术与应用

DOI 10.16605/j.cnki.1007-7847.2023.03.0134

发布时间 2024-05-20

基金项目

国家自然科学基金（81702005）；湖南省自然科学基金项目（2019JJ50370）