产毒艰难梭菌多重实时荧光PCR检测方法的建立与应用

Development and Application of a Multiplex Real-time Fluorescence PCR Method for Detecting Toxigenic Clostridioides difficile Strains

二维码有效期 120s

摘要本研究建立了一种能同时快速检测艰难梭菌(Clostridioides difficile)不同毒力基因的四重实时荧光PCR方法.首先,分别以艰难梭菌的tcdA(毒素A基因)、tcdB(毒素B基因)、cdtB(二元毒素B亚基基因)和TPI(丙糖磷酸异构酶基因)为靶基因设计特异性引物和探针,建立多重实时荧光PCR体系;然后,优化该体系中的引物、探针以及退火温度,并检测优化后体系的灵敏度、特异性、重复性等;最后,将其应用于临床样本检测.结果表明,该方法特异性强、重复性好、成本低,能够检测1 000copies/mL的样本,与其他常见肠道致病菌无交叉反应.

作者殷仑仑 ^[1] 万旺 ^[2] 邓中平 ^[1] 田向荣 ^[3] 周强 ^[3] 任小梅 ^[1] 学术成果认领

作者单位吉首大学生物资源与环境科学学院,中国湖南吉首 416000;圣湘生物科技股份有限公司基因诊断技术湖南省重点实验室,中国湖南长沙 410205 ^[1] 圣湘生物科技股份有限公司基因诊断技术湖南省重点实验室,中国湖南长沙 410205 ^[2] 吉首大学生物资源与环境科学学院,中国湖南吉首 416000 ^[3]

关键词艰难梭菌毒力基因多重实时荧光PCR 检测方法 Clostridioides difficile virulence gene multiplex real-time fluorescence PCR detection method

分类号 Q93-33 R446.5

栏目名称

技术与应用

DOI 10.16605/j.cnki.1007-7847.2024.01.0118

发布时间 2025-05-07