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基于适配体亲和毛细管电泳-激光诱导荧光检测的凝血酶分析

Determination of human thrombin by an aptamer based on affinity capillary electrophoresis-laser induced fluorescence detection

摘要以一种高亲和力适配体作为亲和荧光探针,以自建的毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)检测装置为基础,建立了一种高灵敏、快速测定人凝血酶的方法.荧光标记的凝血酶适配体特异性地与凝血酶结合并形成稳定的凝血酶-适配体复合物,采用CE-LIF对复合物进行分离检测,从而测定凝血酶浓度.探讨了盐离子种类及浓度对适配体与凝血酶结合的影响,并在选定的电泳条件下对凝血酶检测的线性范围、检出限和重现性进行了测定.结果表明,盐离子存在的条件下适配体与凝血酶的亲和力降低,不利于两者的结合;人血清溶液中,凝血酶浓度在0.25~10 nmol/L 范围内与复合物峰面积具有良好的线性相关性(r2=0.991),检出限(S/N=3)为55.6 pmol/L;精密度和回收率测定结果均能满足分析的要求.

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分类号 O658
栏目名称 研究论文
DOI 10.3321/j.issn:1000-8713.2009.03.016
发布时间 2009-06-19
基金项目
国家自然科学基金 中国科学院知识创新工程青年人才领域前沿项目 中国科学院生态环境研究中心青年人才专项基金
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