超高效液相色谱-串联质谱法定性和高效液相色谱法定量分析天南星中氨基酸成分

Qualitative and quantitative analysis of the amino acids in Rhizoma Arisaematis by ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry and high performance liquid chromatography

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摘要为建立中药材中氨基类极性非紫外活性成分的定性与定量分析方法，以中药材天南星为研究对象，采用柱前衍生化技术，以异硫氰酸苯酯（PITC）为衍生化试剂，经 C18色谱柱（100 mm×2.1 mm，3.5μm）分离和超高效液相色谱-串联质谱（ UHPLC-MS／MS）分析，共解析了天南星中20个成分，包括18个氨基酸和2个胺类化合物。经优化衍生化条件，应用高效液相色谱法（HPLC），以 Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm）分离，以乙腈和0.05 mol／L醋酸铵-醋酸缓冲液（ pH 6.5）为流动相，梯度洗脱，在254 nm 下检测，建立了同时测定15种氨基酸含量的方法，经方法学考察符合含量测定要求。谷氨酸、色氨酸在2~100 mg／L 范围内、精氨酸在6~300 mg／L 范围内、其余各氨基酸在0.8~40 mg／L范围内均呈良好的线性关系，相关系数均不小于0.9995；平均回收率在95％~105％之间，RSD均小于3％；并成功应用于12批中药材的测定。本方法简便、灵敏、准确，具有可操作性，可用于快速鉴定中药中的氨基类成分以及进行含量测定。