高效液相色谱-蒸发光散射法分析海参脑苷脂和神经酰胺的含量
Simultaneous quantitative analysis of cerebrosides and ceramides from sea cucumbers by high performance liquid chromatography coupled with evaporative light-scattering detection coupled with evaporative light-scattering detection
摘要目的:建立了一种高效液相色谱-蒸发光散射检测方法(high performance liquid chromatography coupled with evaporative light-scattering detection, HPLC-ELSD)同时分析海参中脑苷脂和神经酰胺含量的方法。方法以TSKgel CN-80Ts柱为分离柱,正己烷-异丙醇-二氯甲烷-甲醇为流动相,采用梯度洗脱方式,流速1.0 mL/min,漂移管温度50℃,氮气流速2.4 L/min。结果在优化条件下,18 min内完成分离,脑苷脂的线性范围为2.5~250μg/mL,检出限为0.5μg/mL(S/N=3),相关系数R>0.99,神经酰胺的线性范围为5~150μg/mL,检出限为0.05μg/mL(S/N=3),相关系数R>0.99,方法稳定性良好;不同种海参中脑苷脂和神经酰胺含量存在较为明显的差异,含量范围分别为0~4.44 mg/g和0.24~2.21 mg/g。其中,猪参的脑苷脂含量最高为4.44 mg/g,而白底靴参的脑苷脂未能检出。阿拉斯加红参的神经酰胺含量最高为2.21 mg/g,而海地瓜神经酰胺含量最少。结论所建立的方法灵敏、准确、快速,可应用于食品中脑苷脂和神经酰胺的同时定量分析。
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