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谷氨酸棒杆菌L-色氨酸营养缺陷型突变及其高产菌株的选育

Study on breeding of Corynebacterium glutamicum L-tryptophan auxotrophic strains with high yield

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摘要目的：以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)HX-22为出发菌株,研究了目标发酵产物L-色氨酸合成途径交叉反馈抑制途径代谢突变与色氨酸分解代谢类似物抗性的营养缺陷型突变诱导过程及 L-色氨酸高产复合突变菌株的筛选。方法采用硫酸二乙酯、紫外线、钴60γ-射线等诱变方法交叉处理起始与突变菌株,通过营养缺陷表型和自杀代谢底物抗性的筛选方法,定向突变和选育 L-色氨酸合成与分解代谢突变的色氨酸高产菌株。结果通过多次连续营养缺陷型诱变选育,筛选出一株具有分支酸-Trp/Phe/Tyr代谢途径L-Phe和 L-Tyr 合成缺陷型和 L-Trp 分解代谢自杀代谢底物抗性的 L-色氨酸高产菌 HX22-118(?Phe--?Tyr--5FTr-4FPr-SGr)；通过连续传代10次发酵,色氨酸产酸最高达到28.4 g/L,平均27.1 g/L,较出发菌株HX22产酸水平提高81.8%。结论选育出的高产菌株具有多重代谢途径突变(?Phe--?Tyr--5FTr-4FPr-SGr),突变体具有良好的遗传稳定性,具有后续工业化生产应用潜力。