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一种检测β溶血性链球菌的荧光环介导等温扩增方法的建立

Establishment of a fluorescent loop-mediated isothermal amplification method for detection of β Streptococcus hemolyticus

摘要目的 建立荧光环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法用于β溶血性链球菌的快速检测.方法 针对β溶血性链球菌spy1258基因设计4对特异性引物,对建立的LAMP体系优化其反应扩增条件,对该方法特异性和灵敏度评价,并将该方法和国标法分别应用于10份牛奶样品的检测.结果 该方法特异性强,内外引物比为3:1,反应温度为63℃时达到最佳反应条件,检测灵敏度达100 fg/μL,检出限低至9.8 CFU/mL,且10种样品的LAMP法与传统国标法检测结果一致.结论 本研究建立的荧光LAMP法具有快速、直观、灵敏度高和特异性强等优点,可应用于食品β溶血性链球菌的初步筛选.

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