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继代培养对链格孢菌生长及产毒的影响

Influences of subculture on the growth and Alternaria toxins production of Alternaria alternata

摘要目的 探究连续继代培养对链格孢菌(Alternaria alternata)菌株的生长以及产毒的影响.方法 将10株链格孢菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(potato dextrose agar,PDA)上连续继代培养,分析菌株的生长、产孢情况;利用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测并分析主要链格孢霉毒素[包括交链孢酚(alternariol,AOH)、交链孢酚单甲醚(alternariol monomethyl ether,AME)、交链孢烯(altenuene,ALT)、细交链格孢菌酮酸(tenuazonic acid,TeA)]的含量变化.结果 在PDA 培养基中,连续继代培养链格孢菌极易出现角变、菌丝变白、菌丝生长速率加快等菌株退化现象.随着继代培养次数的增加,菌株生长速度加快,菌落直径变大,角变率增大;10 株链格孢菌中有 7 株(MY-4、MY-12、MY-15、MY-73、MY-80、MY-103、MY-117)产孢量随着继代次数的增加先增加后降低,3株(MY-65、MY-67和MY-108)产孢量随着继代次数的增加显著降低;10株链格孢菌中有4株可以产生TeA毒素,且TeA毒素的含量随着继代次数的增加先上升后下降,第五代菌株(F5)产毒能力最强.继代培养对ALT毒素含量影响较大,除MY-103以外,随着继代次数的增加,ALT毒素的含量显著降低(达91.13%~99.85%).AOH和AME毒素含量随着继代次数的增加呈下降或者呈先上升后下降的趋势.结论 连续继代培养 5 代对链格孢菌的生长、产孢、产毒等均会产生较大影响.在菌株的实际应用过程中,应该避免菌株过多次的继代培养,尽量使用5代以内的链格孢菌.

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