换一批多重荧光定量聚合酶链反应法检测肉制品中的3种食源性致病菌
Determination of 3 kinds of food-borne pathogens in meat products by multiple fluorescence quantitative polymerase chain reaction
摘要目的 建立多重荧光定量聚合酶链反应法(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)快速检测肉制品中沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7 3 种食源性致病菌的方法.方法 根据沙门氏菌的invA基因、单增李斯特菌的hemolysin基因、大肠杆菌O157:H7 的rfbE基因序列分别设计特异性引物及探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度、特异性和重复性,建立了可同时检测上述 3 种食源性致病菌多重qPCR方法.结果 该方法只扩增 3 种靶细菌,对其他供试菌不扩增;沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7 的检出限分别为 101、102、102 拷贝数/μL,并且拥有良好的重复性和特异性.人工污染的猪肉样品经SLE培养基富集8 h后,分别可以检测到初始菌液浓度为1.56×102 CFU/25 g的沙门氏菌,2.13×102 CFU/25 g的单增李斯特菌,2.32×102 CFU/25 g的大肠杆菌O157:H7.结论 所建立的多重qPCR灵敏度高、特异性强、重复性好,可同时检测肉制品中沙门氏菌、单增李斯特菌和大肠杆菌O157:H7 3 种食源性致病菌,在提高食品安全和保护人类健康方面有重要意义.
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关键词
沙门氏菌单增李斯特菌大肠杆菌O157H7多重荧光定量聚合酶链反应法SalmonellaListeria monocytogenesEscherichia coli O157H7multiple fluorescence quantitative polymerase chain reaction
栏目名称
DOI
10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.20231121005
发布时间
2024-06-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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