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碱法提取蝉蛹蛋白及其免疫调节功能研究

Study on extraction of protein from Cryptotympana atrata by alkali method and its immunomodulatory function

摘要目的 研究蝉蛹蛋白(Cryptotympana atrata protein,CA-P)的制备工艺及其免疫调节活性.方法 采用单因素法对影响CA-P提取的溶剂、料液比、氢氧化钠浓度、提取温度、提取时间、提取次数及沉降等电点进行优化.采用环磷酰胺所致小鼠免疫低下模型评价CA-P的免疫调节活性,实验动物分为正常组、模型组、阳性对照组(香菇多糖250 mg/kg·d)、CA-P低、中和高剂量组[125、250和500 mg/(kg·d)].以小鼠体重、免疫器官指数、脾淋巴细胞增殖率、自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)活性、血清中免疫球蛋和细胞因子为指标,对CA-P的体内免疫调节活性进行评价.结果 CA-P的最佳提取工艺为碱提[0.1 mol/L的NaOH溶液、料液比1∶20(g∶mL)、在60℃条件下搅拌提取6h],酸沉(沉淀pH 4.0).3个剂量的CA-P均对免疫低下小鼠的体重下降有改善作用,可显著提高小鼠脾脏和胸腺指数,有效促进小鼠脾淋巴细胞增殖,增强NK活性.此外,CA-P干预组小鼠血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、细胞因子γ干扰素、肿瘤坏死因子α、白细胞介-2、白细胞介素-4和白细胞介素-10的分泌水平均有所提高.结论 采用碱提酸沉法可有效提取CA-P,且提取物具有良好的免疫增强活性.

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