高效液相色谱法检测奶及奶制品中未变性乳铁蛋白
Detection of native lactoferrin in milk and dairy products using high performance liquid chromatography
摘要目的 建立一种基于高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定奶及奶制品中未变性乳铁蛋白的分析方法.方法 本研究探索了奶及奶制品前处理方法、分析未变性乳铁蛋白的方法的液相色谱条件、检出限、定量性、线性范围、重复性、再现性等关键参数.结果 利用磷酸盐缓冲液对样品进行稀释,用 1 mL规格的HiTrapTM Heparin HP肝素亲和柱进行富集和纯化为简单有效的前处理方法,分析未变性乳铁蛋白的液相色谱条件为:XBridge Protein BEH C4 色谱柱(4.6 mm×250 mm,3.5 μm),柱温 60℃.针对液态奶样品,本方法的检出限为 2.5 mg/kg、定量限为 5.0 mg/kg,回收率为 106.0%~107.5%;针对乳粉样品,本方法的检出限为 5.0 mg/kg、定量限为10.0 mg/kg,回收率为103.5%~107.7%.奶及奶制品中未变性乳铁蛋白的定量上限为100 mg/kg,在线性范围内具有良好的线性关系(r2>0.999).平行性实验、日间实验、日内实验和实验室间比对实验表明,本方法具有良好的重复性和再现性.结论 本方法前处理简单、检测速度快,可以实现对不同类型奶及奶制品中未变性乳铁蛋白的定量分析,可为企业和质检机构评价奶及奶制品品质提供标准.
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