玉米赤霉烯酮结构类似物在免疫亲和柱柱容量实时监测中的应用
Application of zearalenone structural analogues in real-time monitoring of column capacity in immunoaffinity columns
摘要目的 探索一种可以在检测过程中实时监测玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)免疫亲和柱柱容量的方法.方法 将两种ZEN的天然结构类似物:α-玉米赤霉烯醇(α-zearalanol,α-ZEL)、β-玉米赤霉烯醇(β-zearalanol,β-ZEL)与戊二酸酐酯化反应合成了 ZEN的两种人工结构类似物(α-ZEL-G、β-ZEL-G),样品纯化后,通过荧光、紫外、高分辨率质谱法对其进行了鉴定;利用免疫亲和柱的抗体建立了竞争酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)曲线,通过半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)比较它们与抗体之间的亲和力.分别将α-ZEL-G和β-ZEL-G作为柱容量示踪物,与不同浓度的ZEN 一起加入免疫亲和柱结合,探索建立一种免疫亲和柱柱容量实时监测的方法.结果 ZEN、α-ZEL-G和β-ZEL-G的竞争ELISA曲线的IC50分别为:2.0、1.3和10.0ng/mL,表明α-ZEL-G与抗体的亲和力略高于ZEN,而β-ZEL-G与抗体的亲和力则明显低于ZEN与抗体的亲和力.实验结果表明:α-ZEL-G在不同柱容量的免疫亲和柱中会影响ZEN的回收率,而β-ZEL-G的加入量在柱容量50%时,不同浓度的ZEN的回收率大于80%.结论 与抗体亲和力更低的β-ZEL-G更适合用于柱容量实时监测,在实际样品的检测中显示出良好的应用效果.
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