液相色谱-荧光法测定乳粉中4种母乳低聚糖
Determination of 4 kinds of breast milk oligosaccharides in milk powder by liquid chromatography-fluorescence method
摘要目的 建立液相色谱-荧光法同时测定乳粉中 4 种母乳低聚糖[2'-岩藻糖基乳糖(2'-fucosyllactose,2'-FL)、3'-唾液酸乳糖(3'-sialyllactose,3'-SL)、6'-唾液酸乳糖(6'-sialyllactose,6'-SL)和乳糖-N-新四糖(lacto-N-neo-tetraose,LNnT)]的含量分析方法.方法 样品加水溶解后,使用淀粉葡萄糖苷酶或和β-半乳糖苷酶酶解,用 2-氨基苯甲酰胺(2-aminobenzamide,2-AB)和 2-甲基吡啶硼烷(2-methylpyridine borane,2-PB)衍生后,采用酰胺键合色谱柱分离,荧光检测器检测和内标法定量.结果 4 种母乳低聚糖在10~600 μg/mL质量浓度范围均有良好的线性关系,相关系数均为r2>0.999;4种母乳低聚糖的检出限和定量限分别为0.94~2.31 mg/100 g、3.12~7.69 mg/100 g;4 种母乳低聚糖加标回收率为 97.7%~101.5%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)(n=7)为 0.53%~3.09%.结论 该方法对测定乳粉中的 4 种母乳低聚糖含量的检测人员、设备和环境要求不高、前处理操作简单,且具有良好的准确度和精密度,可为乳粉中母乳低聚糖质量控制提供方法参考.
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