可降解磺胺嘧啶的重组细菌漆酶诱导表达和酶学性质研究
Induced expression and enzymatic properties of recombinant bacterial laccase degrading sulfadiazine
摘要目的 探究重组细菌漆酶诱导表达水平及酶学特性,提高细菌漆酶对磺胺嘧啶抗生素的降解效率.方法 本研究通过单因素实验探讨了诱导温度、诱导时间以及异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactopyranoside,IPTG)浓度对酶表达量的影响.并通过pH和温度两方面对重组细菌漆酶的酶学性质进行探究.结果 24 h重组细菌漆酶对磺胺嘧啶的降解率达50%.重组细菌漆酶在大肠杆菌BL21(DE3)中的最适表达条件为:诱导温度16 ℃,诱导时间16 h,IPTG浓度0.2 mmol/L.最适pH为3,在pH为7时,稳定性最好,6 h酶活达到150%;最适温度为80 ℃,在温度为70 ℃时热稳定性最好,1 h提高到120%,半衰期约为6h.结论 本研究为细菌漆酶在磺胺嘧啶抗生素降解中的应用提供了实验基础,并为未来研究其在工业中的潜在应用奠定了理论依据.
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